Żywe zarodki od iniekcji okrągłych spermatowców do oocytów

Poprzez wstrzyknięcie nasienia do cytoplazmy komórki jajowej1 możliwe jest teraz zapłodnienie i ciąża w przypadku obturacyjnej azoospermii lub ciężkiej oligozoospermii i astenospermii po uzyskaniu plemników bezpośrednio z najądrza lub jąder.2 Mimo to wielu pacjentów z nieobciążoną azoospermią nie może z nich korzystać. techniki. Niedawno zgłoszone narodziny normalnych myszy po elektryfikacji oocytów za pomocą okrągłych spermatoidów, najmłodszych męskich komórek rozrodczych, które mają zbiór haploidalnych chromosomów3, zasugerowały nowe podejście do leczenia tego stanu.
W naszym programie do iniekcji nasienia widzieliśmy 12 mężczyzn z niewyjaśnioną azoospermią. W ejakulatach tych mężczyzn znaleziono okrągłe spermatydy. W siedmiu przypadkach oocyty zostały już odzyskane od partnera pacjenta i podjęto decyzję, aby spróbować je zapłodnić poprzez wstrzyknięcie okrągłych spermatoidów.
Wstrzyknięcia wykonano tymi samymi podstawowymi technikami i sprzętem, które stosuje się do wstrzyknięcia nasienia.4 Nasycone nasiona azoospermalne nawarstwiono na nieciągły gradient Percoll (którego warstwy zawierały 40%, 60%, 70%, 80% i 100% koloidu). zawiesiny) i odwirowano przy 330 x g przez 20 minut. Komórki z 70 procent frakcji Percoll przemywano i ponownie zawieszano w 10 procentowym roztworze powidonu w pożywce do przygotowania plemników. Dla każdej komórki jajowej w drugim etapie metafazy wybrano jeden okrągły spermatid, zassano do igły do mikroiniekcji i wstrzyknięto głęboko do ooplazmy. Aktywacja oocytów została wzmocniona przez energiczne aspiracje ooplazmatyczne w momencie wstrzyknięcia.
Prawidłowe nawożenie (jak pokazuje obecność dwóch przedjądrzy w dniu po wstrzyknięciu) wystąpiło w 14 z 39 oocytów (36 procent). Wszystkie te zygoty rozszczepiły się do stadium co najmniej dwóch komórek 44 godziny po wstrzyknięciu i przeniesiono je do macicy pacjenta. Co najmniej jeden zarodek został wszczepiony do każdej z siedmiu kobiet. Ciąże kliniczne ustalono u dwóch kobiet. Jeden zdrowy chłopiec (3500 g) został dostarczony przez sekcję cesarską w 39 tygodniu ciąży. Drugie narodziny przewidywane są we wrześniu 1995 r .; płód ma prawidłowy kariotyp i morfologię.
Te wyniki pokazują, że normalne ludzkie zarodki można uzyskać przez wstrzyknięcie okrągłych spermatoidów. Ponieważ normalna aktywacja ludzkich oocytów wymaga czynnika uwalnianego z plemników, 4 wyniki pokazują również, że ten czynnik aktywujący oocyt jest obecny w okrągłych spermatozach. Co więcej, wykrycie okrągłych spermatanów we wszystkich badanych ejakulach azoospermalnych sugeruje, że wielu pacjentów z wadliwą spermiogenezą, które uważa się za nieuleczalne, może skorzystać z tej nowej techniki wspomaganego zapłodnienia bez potrzeby interwencji urologicznej.
Dr n. Med. Jan Tesarik
Szpital amerykański w Paryżu, 92202 Neuilly-sur-Seine, Francja
Carmen Mendoza, Ph.D.
University of Granada, 18071 Granada, Hiszpania
Jacques Testart, Ph.D.
INSERM, Unité 355, 92140 Clamart, Francja
4 Referencje1. Palermo G, Joris H, Devroey P, Van Steirteghem AC. Ciąża po wstrzyknięciu śródtoplazmatycznym pojedynczego plemnika do oocytu Lancet 1992; 340: 17-18
Crossref Web of Science MedlineGoogle Scholar
2. Silber SJ. Zastosowanie nasienia najądrzy w rozmnażaniu wspomaganym. W: Tesarik J, wyd. Czynnik męski w niepłodności u ludzi. Rzym: Ares-Serono Symposia, 1994: 335-68.
Google Scholar
3. Ogura A, Matsuda J, Yanagimachi R. Narodziny normalnego potomstwa po elektryfikacji mysich oocytów za pomocą okrągłych spermatoidów. Proc Natl Acad Sci USA 1994; 91: 7460-7462
Crossref Web of Science MedlineGoogle Scholar
4. Tesarik J, Sousa M, Testart J. Aktywacja ludzkich komórek jajowych po wewnątrznaczyniowym wstrzyknięciu plemnika. Hum Reprod 1994; 9: 511-518
Web of Science MedlineGoogle Scholar
(147)
[przypisy: skierowania do sanatorium zwroty, badanie ubm, pelagra choroba ]